厭氧工作站亦稱厭氧培養(yǎng)箱或厭氧手套箱。厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境條件下進行細(xì)菌培養(yǎng)及操作的專用裝置。它能提供嚴(yán)格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養(yǎng)條件和具有一個系統(tǒng)化、科學(xué)化的工作區(qū)域。
4)操作室放入1000g鈀粒(密封),由冷凝系統(tǒng)除濕,并放入?yún)捬踔甘緞?/div>
5)關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗。(按控制面牌上真空泵鍵,按一下開,再按一下關(guān))
6)操作室內(nèi)一次置換(氮氣置換):
?。?)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口,另一個插入塑料袋。
?。?)接通氮氣進氣路,打開操作室氮氣控制閥,使兩只塑料袋充足氮氣后,關(guān)閉電磁閥,然后扎緊袋口。
?。?)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
?。?)把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸的放于操作室內(nèi),至全部防除。
7)操作室第二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次沖氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。
8)操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%)
?。?)調(diào)換氣路打開操作室混合氣閥進氣,沖氣時取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關(guān)閉排氣。
?。?)混合氣充滿塑料袋后,關(guān)閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器、流量計、調(diào)整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。
?。?)把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
(4)通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)
9)操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,并在厭氧指示條反應(yīng)區(qū)上滴一點潔凈水,1-2小時后,觀察其變色情況,反應(yīng)部分深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
10)紫外線滅菌燈,室內(nèi)進行滅菌處理,滅菌時間自定。
菌種的置入和培養(yǎng)
1)檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。
2)打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外們。
3)取樣室充氮置換三次過程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后打開取樣室氧氣閥進氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束。
4)如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5)取樣室外門開啟、關(guān)緊后,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗。
6)厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件
(1)每天在操作室內(nèi)放入美蘭指示條觀察,如不能正常就必須重新?lián)Q氣。
(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結(jié)合通過催化吸收,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
?。?).連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內(nèi),干燥2-3小時可使其復(fù)原)
7)接種棒滅菌器的應(yīng)用:
?。?)隨時用鎳?yán)与姛峤z使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
?。?)熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。
8)操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。
注意事項
1.儀表盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方。
2.開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。
3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境后放入。
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。(超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理)。
5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。
6.調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體
7.真空泵按要求使用,定期檢查加油。
8.停止使用,關(guān)閉總電源鍵,及設(shè)備后部的電源開關(guān)